PCR para VIH

Tema: Optimización de la técnica de PCR reversa para la detección de VIH en plasma de pacientes infectados

Objetivo: Evaluar la viabilidad de realizar un PCR para el ADN del VIH-1 con el fin de diagnosticar la enfermedad y proporcionar un tratamiento adecuado para la misma.

Muestra: Plasma

Tipo de ácido nucleico: ADNc

Gen a amplificar: env 336pb

Cebador azaroso (random primer) y enzima RT "SuperScript" TM (200 U/uL)

Extracción del ADN: QIAGen QIAmp Viral RNA Mini Kit

PCR: RT-PCR

• Desnaturalización: 1 ciclo de 2 minutos a 95°C y 35 ciclos de 30 segundos a 95°C
• Hibridación: 35 ciclos de 30 segundos a 55°C
• Elongación: 35 ciclos de 60 segundos a 72°C

Visualización por electroforesis: EFO en gel de agarosa al 2%

Sensibilidad analítica: 93,5% 

Especificidad analítica: 91,7%

BIBLIOGRAFÍA:

Ameli G, Gutiérrez C, D'Angelo P, Rangel, H. Optimización de la técnica de PCR reversa para la detección de VIH en plasma de pacientes infectados. Redalyc. 2013; 33(2)